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BenzoNuclease(His tag)是来源于Serratiamarcescens的非特异性核酸内切酶。利用基因重组技术，在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。该酶具有降解任意形式的DNA和RNA活性，包括双链、单链、线状、环状等，可将核酸完全消化成2～5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。

• 蛋白提取时去除核酸污染；
  
• 蛋白纯化过程中去除核酸污染；
  
• 疫苗及制药工业中去除宿主残留核酸；
  
• Western-blot；
  
• IP-Western。

组分	10kU	50kU
BenzoNuclease(His tag，≥250U/μL)	40μL	5×40μL
说明书	1份	1份

保存：-20℃


20mM Tris-Cl，2mM MgCl₂，2mM NaCl，50% Glycerol，pH8.0。


经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带，纯度达90%，PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。


一个活性单位指在2.625mL体系中，37℃，pH8.0条件下，30分钟内使△A260降低1.0（相当于完全消化37μg DNA）所需要的酶量。


最适温度：37℃
最适pH：pH8.0


1～10mM Mg²⁺，0～100mM DTT，0～100mM 2-ME，0～150mM单价阳离子(Na+,K+)，pH6.0～10.0，0～42℃。

• 100mM NaOH，70℃处理30分钟可使BenzoNuclease完全失活；
  
• 采用EDTA螯合金属离子会可逆地抑制BenzoNuclease部分活性；
  
• 在95℃,5min会抑制BenzoNuclease部分活性；
  
• 在-70℃，＞48h，可使1U/μl的BenzoNuclease失活。

• 不可长期保存在–70℃，超低温使BenzoNuclease失活；
  
• BenzoNuclease的活性需要1～2mM Mg²⁺。而在单价阳离子浓度>50%，磷酸浓度>20mM，硫酸铵浓度>25mM等情况下，BenzoNuclease的活性会降低50%。

图1．在20μL体系中，在37℃，30min条件下，1U BenzoNuclease消化不同形式DNA的结果。
泳道M：DNA Ladder 2000；
泳道1：Lambda/HindIII；泳道2：Lambda/HindIII + 1U BenzoNuclease；
泳道3：ECorI和SalI酶切的Puc19片段；
泳道4：ECorI和SalI酶切的Puc19片段+ 1U BenzoNuclease；
泳道5：Puc19质粒；泳道6：Puc19质粒+ 1U BenzoNuclease；
泳道7：pBAD质粒；泳道8：pBAD质粒+ 1U BenzoNuclease；
泳道9：Lambda DNA；泳道10：Lambda DNA+ 1U BenzoNuclease；
泳道11：800bp的PCR产物；泳道12：800bp的PCR产物+ 1U BenzoNuclease.
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